ELISA直接法測長葉車前花葉病毒（RMV）含量實驗步驟
更新時間：2014-03-04 點擊量：3159
ELISA直接法測長葉車前花葉病毒（RMV）含量實驗步驟
- 將不同濃度的待檢測RMV溶液作為樣品液，在測定板每孔各加250ul,至冰箱（4℃）中孵育過一夜。
- 孵育后，去除孔穴內抗原溶液，用PBS-Tween20溶液緩緩沖洗孔穴3次，每次3min，然后去凈洗滌液。
- 每孔穴加250ulRMV的酶標記抗體溶液（用1%牛血清白蛋白的PBS- ween20稀釋）在恒溫箱（37℃）里孵育3-6h,或6℃下過一夜。
- 去除孔穴酶標記抗體溶液，用PBS-Tween20溶液緩緩沖洗3次每次3min，然后去凈洗滌液。
- 每孔穴加入新鮮配備的底物溶液250ul,室溫放置0.5h，或者放置出現黃色。
- 加入50ul3N NaOH，終止反應。
- 對每孔穴的黃色溶液，測定449nm波長處的吸光值。
討論
- 如該聚苯乙烯塑料微量反應板*次使用，應分別用標準濃度的RMV溶液、RMV的抗血清及RMV與它的IgG形成的免疫結合物，進行期盼滴定法來測該聚苯乙烯塑料微量反應板對RMV抗原和它的抗體的吸附能力。
- 在正式測樣品前，用0.1mol/L pH9.6碳酸鹽緩沖液配置各種標準濃度的RMV溶液，依照實驗步驟測定RMV各種標準濃度的A449nm值，以病毒標準濃度為橫坐標，A449nm值為縱坐標繪制標準曲線，由此可以測出RMV包被的濃度。
- 測出原始底物的吸光值，以便核準數據。
- 對照標準曲線，就可算出樣品液中RMV的含量。
- 如無牛血清白蛋白，可用0.1%白明膠代替。
- 對于不穩定的病毒，用中性緩沖液稀釋。
- 如有ELISA測定儀，可快速測定。
- 腦源性神經營養因子(BDNF)ELISAKit
人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISAKit
人活化素A(ACV-A)ELISAKit
人神經調節蛋白1(NRG-1)ELISAKit
人心鈉肽(ANP)ELISA Kit
人多巴胺D2受體(D2R)ELISA Kit
人內嗎啡肽-2(EM-2)ELISAKit
人α-內嗎啡肽(α-EP)ELISAKit
人抑制素(INH)ELISA Kit
人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA Kit
人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISAKit
人促睡眠肽(DSIP)ELISAKit
人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISAKit
人心納素(ANF)ELISAKit
人神經髓鞘蛋白(p2)ELISAKit
人精氨酸加壓素(AVP)ELISA Kit
人垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)ELISAKit
人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISAKit
人神經絲蛋白(NF)ELISA Kit
人利鉀尿肽(KP)ELISA Kit
人神經降壓素(NT)ELISAKit
人神經激肽B(NKB)ELISAvKit
